Page 87 - 6822
P. 87
градієнтного, в умовах якого властивості елюєнту змінюють у
певному напрямі. Частіше компоненти рухаються від менш
полярного до більш полярного елюєнтa.
Досить часто розподіл компонентів суміші значно
покращується при елююванні в двох взаємно перпендикулярних
напрямках. Цей метод називається двомірною ТШХ.
У тому випадку, коли пластини вкриті тонким щільним
шаром сорбенту з однорідними сферичними частинками невеликих
розмірів (5-10 мкм), можна досягнути кращого розділення
компонентів суміші на більш коротких пластинах. При цьому
хроматографують менші проби. Такий варіант отримав назву
високоефективної ТШХ (ВЕТШХ).
Для ТШХ використовують пластини із закріпленим шаром
сорбенту - силікагелем і оксидом алюмінію. Аналізований розчин
наносять на пластину з допомогою шприца або мікропіпетки . Як
правило, об'єм проби у звичайній ТШХ складає 1 - 5 мкл. Пробу
слід розчинити у розчинниках ,які легко випаровуються , щоб
розмір плями на пластині був мінімальним .
Пластинку з нанесеними пробами поміщають у камеру для
хроматографування. Камера являє собою посудину з плоскими
стінками. Для отримання правильної хроматограми у камері
необхідно створити атмосферу, насичену парами вибраного
розчинника. Для цього у камеру розміщують вздовж її задньої
стінки фільтрувальний папір, змочений у розчиннику. Після
просування по пластинці розчинника на 10 - 15 см її виймають з
камери і роблять відмітку лінії фронту, обережно сушать у
сушильній шафі або над електричною плитою. Проявляють
отриману хроматограму відповідним розчином.
Для отримання відтворених результатів важливо проводити
експеримент у стандартних умовах, тобто :
- розмір пластинок 20 на 20 см ;
- товщина шару носія перед сушкою 0, 25 мм;
- зберігати пластинки потрібно в ексикаторах над
розчинником;
- лінія старту повинна бути на відстані 1-2 см від краю
пластини, а нанесені проби - на 1-2 см одна від одної;
- довжина шляху просування –10 см;
87