Page 87 - 6822
P. 87

градієнтного,  в  умовах  якого  властивості  елюєнту  змінюють  у
                            певному  напрямі.    Частіше  компоненти  рухаються  від  менш
                            полярного до більш полярного елюєнтa.
                                   Досить  часто  розподіл  компонентів  суміші  значно
                            покращується  при  елююванні  в  двох  взаємно  перпендикулярних
                            напрямках. Цей метод називається двомірною ТШХ.
                                   У  тому  випадку,  коли  пластини  вкриті  тонким  щільним
                            шаром сорбенту з однорідними сферичними частинками невеликих
                            розмірів  (5-10  мкм),  можна    досягнути  кращого  розділення
                            компонентів  суміші  на  більш  коротких  пластинах.  При  цьому
                            хроматографують  менші  проби.  Такий  варіант  отримав  назву
                            високоефективної ТШХ (ВЕТШХ).
                                   Для ТШХ  використовують пластини із закріпленим шаром
                            сорбенту  -  силікагелем  і  оксидом  алюмінію.  Аналізований  розчин
                            наносять на пластину з допомогою шприца або мікропіпетки . Як
                            правило,  об'єм  проби  у  звичайній ТШХ  складає  1  -  5  мкл.  Пробу
                            слід  розчинити  у  розчинниках  ,які  легко  випаровуються  ,  щоб
                            розмір плями на пластині був мінімальним .
                                   Пластинку з нанесеними пробами поміщають у камеру для
                            хроматографування.  Камера  являє  собою  посудину  з  плоскими
                            стінками.  Для  отримання  правильної  хроматограми  у  камері
                            необхідно  створити  атмосферу,  насичену  парами  вибраного
                            розчинника.  Для  цього  у  камеру  розміщують  вздовж  її  задньої
                            стінки  фільтрувальний  папір,  змочений  у  розчиннику.  Після
                            просування по  пластинці  розчинника на  10  -  15  см  її  виймають  з
                            камери    і  роблять  відмітку  лінії  фронту,  обережно  сушать  у
                            сушильній  шафі  або  над  електричною  плитою.  Проявляють
                            отриману хроматограму  відповідним розчином.
                                   Для отримання відтворених результатів важливо проводити
                            експеримент у стандартних умовах, тобто :
                                   - розмір пластинок 20 на 20 см ;
                                   - товщина шару носія перед сушкою 0, 25 мм;
                                   -  зберігати  пластинки  потрібно  в  ексикаторах  над
                            розчинником;
                                   -  лінія  старту  повинна  бути  на  відстані  1-2  см  від  краю
                            пластини, а   нанесені проби - на 1-2 см одна від одної;
                                   - довжина шляху просування –10 см;


















                                                            87
   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92